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丙型肝炎实验室检测,有必要了解一下

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丙型肝炎呈全球性流行。据世界卫生组织统计,全球HCV的感染率约为3%,估计约1.7亿人感染了HCV,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。我国一般人群抗-HCV阳性率为3.2%。

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)引起的一种肝脏疾病。HCV属于黄病毒科(flaviviridae),其基因组为单股正链RNA。基因组易变异,根据Simmonds命名,可分为6个基因型及不同亚型(1a/1b/1c,2a/2b/2c,3a/3b,4a,5a,6a)。不同基因型引起的临床表现也不尽相同,HCV基因型将有助于丙肝临床诊断、预测疗效,为调整用药剂量及治疗时间,制定个体化抗病毒治疗方案提供指导。

丙型肝炎传播途径

01
血液传播

(1)经输血和血制品传播。由于抗-HCV存在窗口期、抗-HCV检测试剂的质量不稳定及少数感染者不产生抗-HCV,因此,无法完全筛出HCV阳性者,大量输血和血液透析仍有可能感染HCV。检验医学网

(2)经破损的皮肤和黏膜传播。这是目前最主要的传播方式,在某些地区,因静脉注射毒品导致HCV传播占60%~90%。使用非一次性注射器和针头、未经严格消毒的牙科器械、内镜、侵袭性操作和针刺等也是经皮传播的重要途径。一些可能导致皮肤破损和血液暴露的传统医疗方法也与HCV传播有关;共用剃须刀、牙刷、纹身和穿耳环孔等也是HCV潜在的经血传播方式。

02
性传播

03
母婴传播

抗-HCV阳性母亲将HCV传播给新生儿的危险性为2%,若母亲在分娩时HCV RNA阳性,则传播的危险性可高达4%~7%;合并HIV感染时,传播的危险性增至20%。HCV病毒高载量可能增加传播的危险性。

04
其他途径

15%~30%的散发性丙型肝炎,其传播途径不明。

接吻、拥抱、喷嚏、咳嗽、食物、饮水、共用餐具和水杯、无皮肤破损及其他无血液暴露的接触一般不传播HCV。

丙型肝炎实验室诊断


血清生化学检测
ALT、AST水平变化可反映肝细胞损害程度,但ALT、AST水平与HCV感染引起的肝组织炎症分度和病情的严重程度不一定平行;急性丙型肝炎患者的ALT和AST水平一般较低,但也有较高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活动度和胆碱酯酶活性降低较少,但在病程较长的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎时可明显降低,其降低程度与疾病的严重程度成正比。

慢性丙型肝炎患者中,约30%ALT水平正常,约40%ALT水平低于2倍正常值上限。虽然大多数此类患者只有轻度肝损伤,但有部分患者可发展为肝硬化。ALT水平下降是抗病毒治疗中出现应答的重要指标之一。


丙型肝炎抗体检测
丙肝抗体是由于人体免疫细胞对丙肝病毒感染所做出的反应而产生的。抗体在血液中循环而且经常性检测到存在。丙肝抗体对身体没有任何的保护作用,如果丙肝抗体呈阳性,并不一定就代表患有丙肝。是否患有丙肝的判断依据是血液中是否含有丙肝病毒,所以丙肝抗体呈阳性的个体不要过于担心,可以进一步的检查来加以确定。检验医学网

抗-HCV酶免疫法(EIA)适用于高危人群筛查,也可用于HCV感染者的初筛。但抗-HCV阴转与否不能作为抗病毒疗效的指标。用第三代EIA法检测丙型肝炎患者,其敏感度和特异度可达99%。但一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出现抗-HCV假阳性,免疫功能缺陷或合并HIV感染者可出现抗-HCV假阴性,急性丙型肝炎患者可因为抗-HCV检测处于窗口期出现抗-HCV阴性因此,HCV RNA检测有助于确诊这些患者是否合并感染HCV。


HCV抗原检测
人感染HCV到产生抗-HCV的平均时间约60d,被称为抗-HCV的窗口期。但HCV核心抗原于HCV感染后12-15d即可检测到,较抗-HCV出现提前5-7周。Peterson等报告,HCV核心抗原的出现时间仅较HCV RNA晚1d。因此,HCV核心抗原筛查可作为HCV感染的早期诊断。

我国《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范(试行)》指出:对初筛呈阳性反应的样品,应用原有试剂双孔或原有试剂加另一种不同原理(或厂家)试剂进行复检,如呈一阴一阳反应者,应进行补充试验。目前常用的补充试验系用RIBA,如Chiron RIBA HCV 3.0 SIA抗HCV确证试剂(RIBA)和新加坡MP Biomedicals Asia Pacific Pte Ltd公司生产的丙型肝炎病毒抗体补充试剂盒(蛋白印迹法)(HCVBlot 3.0,简称MP),但该法价格较贵,操作较复杂,一般实验室不开展此试验。因此,对这些抗-HCV呈一阴一阳反应性标本可检测HCV核心抗原,如HCV核心抗原阳性,可确证抗-HCV为真阳性;但如HCV核心抗原阴性,不能确证抗-HCV为阴性,需进一步检测HCV RNA,如HCV RNA阴性,仍不能确证其阴性,还需用RIBA试验确证,如RIBA试验阴性,则定为抗-HCV阴性;如RIBA阳性,则定为抗-HCV真阳性。因既往感染HCV康复者,其抗-HCV可持续阳性,但HCV RNA和HCV核心抗原为阴性。


HCV RNA检测
➤ HCV RNA定性检测:对抗-HCV阳性的HCV持续感染者,需要通过HCV RNA定性试验确证。HCV RNA定性检测的特异度在98%以上,只要一次病毒定性检测为阳性,即可确证HCV感染,但一次检测阴性并不能完全排除HCV感染,应重复检查。检验医学网

➤ HCV RNA定量检测:HCV RNA定量检测适用于HCV现症感染的确认、抗病毒治疗前基线病毒载量分析、以及抗病毒治疗过程中及治疗结束后的应答评估。定量聚合酶链反应(qPCR)、实时荧光定量PCR法均可检测HCV RNA病毒载量。HCV RNA定量检测的结果使用IU/ml表示。HCV病毒载量的高低与疾病的严重程度和疾病的进展并无绝对相关性,但可作为抗病毒疗效评估的观察指标。在HCV RNA检测中,应注意可能存在假阳性和假阴性结果。

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谁应该接受丙肝检测?
有些人群感染丙型肝炎病毒的风险较高,应该进行HCV检测。这些人群包括:

➤ 有静脉药瘾史者;

➤ 有职业或其他原因(纹身、穿孔、针灸等)所致的针刺伤史者;

➤ 有医源性暴露史,包括手术、透析、不洁口腔诊疗操作、器官或组织移植者;

➤ 有高危性行为史,如多个性伴、男男同性恋者;

➤ HCV感染者的性伴侣及家庭成员;

➤ HIV感染者及其性伴侣;

➤ HCV感染母亲所生的子女;检验医学网

➤ 破损皮肤和黏膜被HCV感染者血液污染者;

➤ 有输血或应用血液制品史者;

➤ 各种有创导管及其他有创介入诊疗者;

➤ 内镜如胃镜、肠镜、气管镜、膀胱镜等检查者;

➤ 血液透析人群;

➤ 肝脏生化检测不明原因异常者,如ALT升高、胆红素升高。

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